近日，《新冠病毒抗原檢測應(yīng)用方案(試行)》發(fā)布，抗原檢測試劑盒也同步投入使用。記者梳理發(fā)現(xiàn)，截至3月16日，國家藥監(jiān)局已批準12個新冠病毒抗原檢測試劑產(chǎn)品，其中9個基于膠體金法。何為膠體金法？《科技周刊》記者邀請南京醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系嚴沁副教授進行科普。
“要回答這個問題，首先要知道新冠病毒長什么模樣。” 嚴沁介紹，新冠病毒是一種內(nèi)含核酸、外披包膜的簡單生命體，在包膜上還有標識著病毒“身份”的蛋白。當(dāng)機體發(fā)現(xiàn)“敵情”，也就是識別出病毒的蛋白后，會啟動一系列免疫反應(yīng)產(chǎn)生抗體。新冠病毒抗原檢測其實就是檢測病毒蛋白。膠體金則是一種膠體形式的金標記生物大分子，在檢測新冠病毒抗原的過程中，可以作為一種顯色媒介與抗體結(jié)合在一起，這樣就相當(dāng)于給抗體染了色，原本肉眼看不到的抗體就能被觀察到。
膠體金法新冠病毒抗原檢測試劑盒的基本原理其實就是“抗原—抗體反應(yīng)”。抗原和抗體就如同“鑰匙和鎖”的關(guān)系，當(dāng)機體免疫系統(tǒng)識別出病毒抗原后產(chǎn)生抗體，抗體進一步與病毒抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且這種特異性結(jié)合在體外也能發(fā)生，這就為研制抗原檢測試劑盒增加了“可行性”。
膠體金法試紙只有約手掌長，還標注著“C”“T”，這代表什么意思呢？其實這小小的試紙可大有學(xué)問。嚴沁告訴記者，在試紙上不同區(qū)段固定有三種不同的抗體。金標抗體即膠體金標記的抗體，能夠識別新冠病毒某種抗原，位于樣本孔和檢測線(Test線，簡稱T線)之間的膠體金結(jié)合墊上。T線抗體位于檢測線上，這種抗體能夠識別的抗原與金標抗體一樣，但是位置不同。這就意味著，新冠病毒的抗原能夠同時被金標抗體和T線抗體識別，相當(dāng)于上了“雙保險”，大大提高了檢測的特異性。第三種抗體是C線抗體，位于控制線(Control線，簡稱C線)上，能夠識別結(jié)合金標抗體。
這三種抗體就像是“三重關(guān)卡”，時刻準備著“攔截”抗原。在進行檢測時，將樣本放入加樣孔之后，由于毛細作用樣本會沿著硝酸纖維素膜向前移動。如果樣本中含有新冠病毒抗原，這時就會首先被結(jié)合墊上的金標抗體識別結(jié)合，形成“病毒抗原—金標抗體”復(fù)合物，并繼續(xù)向試紙末端的吸水墊方向流動，在檢測線上又被T線抗體捕獲，在T線形成“膠體金抗體—病毒抗原—T線抗體”復(fù)合物。由于膠體金大量聚集，因此T線顯現(xiàn)出紅色。由于試紙中金標抗體的量是富余的，因此不會全部截留在T線，還會繼續(xù)往吸水墊方向流動。當(dāng)流至C線時，被專門識別金標抗體的C線抗體捕獲，在C線形成“金標抗體—C線抗體”復(fù)合物。同樣由于膠體金大量積聚，因此C線顯現(xiàn)出紅色。
“由于C線抗體識別金標抗體的能力非常強，所以只要試劑合格C線一定會顯現(xiàn)紅色。”嚴沁說，出現(xiàn)C線代表檢測過程成功，檢測結(jié)果可信。此時需要關(guān)注的就是T線。出現(xiàn)紅色T線代表病毒抗原被成功“捕獲”，意味著新冠病毒抗原檢測陽性。她提醒，需要注意的是，無論T線是否顯色，只要C線沒有顯色，檢測結(jié)果就是無效的，需要使用新的檢測試紙進行重測或選擇核酸檢測。
免疫膠體金技術(shù)并不是個新產(chǎn)物，從上世紀七十年代發(fā)展至今已經(jīng)非常成熟。如生活中常見的早早孕試紙，就是利用了這一技術(shù)，通過檢測尿液中的人絨毛膜促性腺激素來判斷是否懷孕。從另一層面來看，抗原檢測的應(yīng)用范圍也很廣。“可以說抗原—抗體反應(yīng)是免疫學(xué)檢測技術(shù)的基礎(chǔ)。”嚴沁說，如診斷乙型肝炎最常用的乙肝兩對半檢測指標中就有乙肝病毒表面抗原，以及大家熟悉的ABO血型鑒定本質(zhì)上也是一種基于紅細胞表面抗原差異的檢測方法。
此前我們看到不少專家在解讀抗原檢測時都提到，這種方式不能代替核酸檢測，這是為什么呢？嚴沁解釋，目前我國已經(jīng)批準的抗原檢測試劑的敏感性約為75%-98%，低于核酸檢測。這背后的原因是，相較于核酸檢測，抗原檢測少了一個重要的步驟——擴增。“在核酸檢測時，會以病毒核酸為‘模板’不斷復(fù)制，即便是少量的病毒核酸也可以通過擴增被‘捕獲’。”所以抗原檢測時如果樣本中的病毒含量不高或取樣不成功，都可能導(dǎo)致漏診。
